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间接荧光抗体试验测精子抗体

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  将已知抗原(精子)与第一抗体(待检血清)结合后,再与经异硫氰酸荧光素(FITC)标记的第二抗体结合后,在荧光显微镜下,可见绿色荧光,从而判断患者血清中是否存在抗精子抗体。不孕症,女性不孕,喀什妇科医院
 
  【试剂】
 
  (1)0.01mol/L pH 7.4 磷酸缓冲液(PBS)。不孕症,女性不孕,喀什妇科医院
 
  (2)甲醇(分析纯)。
 
  (3)羊抗人 IgG-FITC。
 
  【方法】
 
  (1)取正常男性精液,自然液化。
 
  (2)PBS离心洗涤 3次,去除精浆,调精子浓度为 5×104/mL。不孕症,女性不孕,喀什妇科医院
 
  (3)精子悬液涂片,室温自然干燥。
 
  (4)甲醇固定 10min。
 
  (5)滴加待检血清、阳性血清、阴性血清(处女 AB 型血清),37℃ 湿盒30min。不孕症,女性不孕,喀什妇科医院
 
  (6)PBS洗 3次,每次浸洗 3min。
 
  (7)滴加羊抗人 IgG-FITC,37℃ 湿盒 30min。不孕症,女性不孕,喀什妇科医院
 
  (8)PBS洗 3次后,荧光镜下观察结果。
 
 
  【结果】
 
  荧光镜下观察,精子头部、中段出现荧光为抗精子抗体阳性,不孕症,女性不孕,喀什妇科医院
 
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